脐血间充质干细胞的体外培养及其表面标志变化

• 作者: 刘素芳 段东晓 邢莹 鄢文海 韩雪飞
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 体外培养 CD34 CD38 脐血 间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2010,（14）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2591-2595
• 分类号: R394.2
• 字数: 3764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.14.025

摘要

背景:目前有关脐血间充质干细胞的体外培养和大规模扩增方法不一,存在一定困难.目的:观察脐血间充质样干细胞体外分离和培养的方法,并检测其表面分子的变化.方法:取新鲜采集脐带血,用1.077 g/cm3的淋巴细胞分层液,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞.将脐血单个核细胞接种于37℃、含体积分数为5%CO2培养箱内培养.于不同时间观察细胞形态的变化并通过流式细胞仪检测细胞表面分子的表达情况.结果与结论:从脐血中分离出的单个核细胞,培养中先出现大量的造血细胞集落,CFU-GM与BFU-E集落形成最多,集落分别增加了(37.1+2.3)和(10.4+1.7)倍,瑞氏染色显示这些细胞大多数为粒系的集落(80.1±85.2)%,其次为红系的细胞集落(14.2±1.8)%,7d后出现贴壁的扁平状上皮样细胞和长梭形成纤维样细胞,同时有大量的破骨样细胞混杂.扩增后第14天经流式细胞仪分析CD38+细胞为1.64%,CD34+/CD38+细胞为1_71%,CD34+/CD38-细胞为0.55%,PI+细胞为0.05%,Annexin-V+细胞为0.18%.随着培养时间的延长,细胞数目不断增加,培养21 d时,单个核细胞扩增了近7.8倍.,第28天增加了1.71倍.经流式细胞仪分析CD38+细胞为74.32%,CD34+/CD38+细胞为1.61%,CD34+/CD38-细胞为0.24%.提示脐血间充质干细胞可以体外培养.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段东晓	郑州大学医学院干细胞中心	20	49	4.0	5.0
2	邢莹	郑州大学医学院生理学教研室	73	258	9.0	11.0
6	鄢文海	郑州大学医学院干细胞中心	75	321	11.0	14.0
7	韩雪飞	郑州大学医学院干细胞中心	49	183	7.0	10.0
8	刘素芳	郑州大学医学院生理学教研室	23	94	7.0	8.0