MMP-2靶向RNAi质粒的构建及其对小鼠巨噬细胞MMP-2表达的沉默作用

• 作者: 周宏艳 孙文学 李为民 王政 郭虹凤
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 基质金属蛋白酶 RNA干扰 肺纤维化
• 年，卷（期）: 2010,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 25-26
• 分类号: R655.3
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.18.011

摘要

目的 构建基质金属蛋白酶2(MMP-2)靶向的RNA干扰(RNAi)质粒,观察其对小鼠巨噬细胞MMP-2基因表达的沉默作用.方法 设计能转录小发卡结构RNA的DNA 序列,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6 的真核表达质粒psiSTRIKETM-MMP-2;将此质粒导入小鼠巨噬细胞内,采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测小鼠巨噬细胞中的MMP-2 mRNA 及蛋白表达.结果 重组质粒psiSTRIKETM-MMP-2 用限制性PstⅠ内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳中可清楚地看到重组载体被切为2个片断,证明重组质粒构建成功.将其转染小鼠巨噬细胞后,MMP-2 mRNA及蛋白表达下调.结论 成功构建了MMP-2靶向RNAi质粒,其能明显抑制小鼠巨噬细胞MMP-2 mRNA及蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李为民	哈尔滨医科大学第一临床医学院	262	1493	19.0	27.0
2	王政	哈尔滨医科大学第一临床医学院	20	144	6.0	12.0
3	周宏艳	哈尔滨医科大学第一临床医学院	3	12	2.0	3.0
4	郭虹凤	哈尔滨医科大学第一临床医学院	1	0	0.0	0.0
5	孙文学	哈尔滨医科大学第一临床医学院	16	81	4.0	9.0