人sTRAIL基因载体构建及其在真皮干细胞的表达

• 作者: 戴晓天 梁宇佳 熊玮 缪殿南 董世武 闫国和
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 人sTRAIL基因 克隆 真核表达载体 真皮干细胞 绿色荧光
• 年，卷（期）: 2010,（27）
• 页码范围: 5071-5074
• 分类号: R394.2
• 字数: 4150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.27.030

摘要

背景:基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)抗瘤的生物特性,克隆sTRAIL基因,构建其真核表达载体,为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础.目的:构建真核表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,并转染真皮干细胞,以探究sTRAIL基因导入真皮干细胞的表达情况.方法:采用RT-PCR二步法,以人胎盘组织总RNA为模板,扩增sTRAIL的cDNA序列,将其克隆入pMD18-T载体,随后亚克隆入载体pEGFP-N1中,构建其真核瞬时表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,以Fugene 6转染技术,将sTRAIL基因导入真皮干细胞.倒置显微镜下观测转染后真皮干细胞生长变化及sTRAIL在其中的表达等情况.RT-PCR法对目的基因转染的真皮干细胞进行鉴定.结果与结论:克隆到sTRAIL基因的cDNA序列,成功构建了其真核表达载体,该真核表达载体能携带sTRAIL基因在真皮干细胞中正常表达.倒置显微镜下观测到转染后真皮干细胞生长状态与未转染的真皮干细胞无差异.以经sTRAIL基因转染的真皮干细胞该基因组DNA为模板,用RT-PCR法能扩增到sTRAIL基因cDNA序列.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪殿南	解放军第三军医大学西南医院呼吸内科	1	0	0.0	0.0
2	梁宇佳	解放军第三军医大学西南医院呼吸内科	1	0	0.0	0.0
3	戴晓天	解放军第三军医大学西南医院呼吸内科	1	0	0.0	0.0