人正常神经组织许旺细胞的体外培养

• 作者: 刘强 孙朝晖 张志军 敖强 李妍 王世杰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 许旺细胞 细胞培养 神经组织 人 组织工程
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1829-1832
• 分类号: R394.2
• 字数: 4124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.10.025

摘要

背景:周围神经组织工程所需要的许旺细胞数量巨大.在以往的研究中,由于正常入神经组织的缺乏,常选用大鼠、兔等动物神经组织分离许旺细胞进行培养,而作为异种细胞在临床的应用相对受限.目的:体外培养人正常周围神经的许旺细胞,寻找一种最佳的获取、培养、纯化的方法.方法:切取脑瘫患者周围神经缩窄术中的正常周围神经,以消化培养法为主,结合差速贴壁法纯化培养许旺细胞.将神经组织剪成碎块,接种于含胎牛血清、胶原酶、Dispase酶的培养液中消化培养,离心,将组织块加入培养基中,吹打成单细胞悬液,再移入有多聚赖氨酸的DMEM培养皿中,加入碱性成纤维细胞生长因子培养,当贴壁细胞覆盖培养皿达B5%～90%即可开始传代培养.锥虫蓝染色对培养后的第2,3,4,5,6,7,8,9,10天不同时间许旺细胞进行计数,并经S-100蛋白免疫组织化学染色鉴定计算细胞纯度.结果与结论:4 d后镜下可见基本为纯净的许旺细胞,密度在0.5×10~8 L~(-1)以上.传3代后,许旺细胞计数可达到9×10~8 L~(-1)以上;许旺细胞纯度达85%以上.结果表明,以消化培养法结合差速贴壁方法培养许旺细胞所需时间短,可获得较高纯度的人许旺细胞,能够为进一步的神经组织工程提供细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙朝晖	清华大学玉泉医院神经中心实验室	34	91	5.0	7.0
2	王世杰	清华大学玉泉医院神经外科	16	93	7.0	9.0
3	刘强	山西医科大学第一医院骨科	125	662	12.0	18.0
4	敖强	清华大学玉泉医院神经中心实验室	27	139	7.0	11.0
5	李妍	清华大学玉泉医院神经中心实验室	19	21	3.0	4.0
6	张志军	山西医科大学研究生院	7	13	2.0	3.0