风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化

• 作者: 孟红 宋楠楠 岳盈盈 李志会 李鹏 纪璇 赵元昊
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 风疹病毒 包膜糖蛋白E1 大肠杆菌 表达条件 优化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-19
• 页数: 2页
• 分类号: R371.1
• 字数: 1993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.03.007

摘要

目的 为风疹病毒(RV)感染提供特异性及敏感性高的检测手段.方法 采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202～353 aa片段,并将其插入表达载体pET30a(+),构建pET30a(+)-E1,转化BL21(plysS)菌株,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性;并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度和诱导时间对目的 蛋白表达产量的影响.结果 获得相对分子质量约为16.6 kD的融合蛋白,Western Blot证明其具有良好的抗原性,并确定该蛋白在30 ℃、0.6 mmol/L IPTG的条件下诱导表达4 h可获得最佳表达量.结论 本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础,亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据.