siRNA干扰立早蛋白ICP4对HSV-1病毒复制能力的影响

• 作者: 刘玉涛 宋波 王亚仑 王喜 许予明 贾丽洁 赵莘瑜 韩志强
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: RNA,小分子干扰 ICP4 疱疹病毒1型,人 病毒复制
• 年，卷（期）: 2010,（19）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 76-78
• 分类号: R737.9
• 字数: 2808字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.19.035

摘要

目的 观察siRNA作用于HSV-1病毒的ICP4后对HSV-1复制能力的影响.方法 设计两段靶向HSV-1 ICP4的siRNA和一段阴性对照序列,酶切连接法构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;脂质体法包装重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;嘌呤霉素筛选法建立抗ICP4的siRNA单克隆细胞系(VERO115、VERO3604、VERO115+3604、VERO-CON);TCID50法检测siRNA对HSV-1的病毒复制能力的影响.结果 成功构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;获得重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;成功构建四个抗ICP4的siRNA单克隆细胞系;BAC-HSV-1-GFP病毒感染单克隆细胞系,siRNA作用后野生型VERO细胞的细胞病变效应(CPE)及绿色荧光蛋白(GFP)表达率均近100%,VERO-CON细胞达90%以上.siRNA VERO115及VERO3604的CPE及GFP表达率明显高于VERO115+3604细胞,P＜0.05.且不同位点联合干扰对病毒的抑制作用强于单一位点干扰,低于VERO115和VERO3604,P＜0.05.结论 抗ICP4的siRNA对HSV-1的复制有明显的抑制作用,且不同位点siRNA联合干扰对病毒的复制有协同抑制效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵莘瑜	郑州大学第一附属医院	59	230	8.0	11.0
2	许予明	郑州大学第一附属医院	209	955	14.0	21.0
3	王喜	河南大学环境与规划学院	20	369	9.0	19.0
4	宋波	郑州大学第一附属医院	88	465	11.0	18.0
5	刘玉涛		1	2	1.0	1.0
9	韩志强	郑州大学第一附属医院	14	14	2.0	3.0
10	贾丽洁	郑州大学第一附属医院	6	13	2.0	3.0
11	王亚仑	郑州大学第一附属医院	5	22	2.0	4.0