SYBR Green I荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用

• 作者: 孙晗笑 莫雪梅 闫莉
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应,实时性 重组病毒巨噬细胞炎症蛋白 人类免疫缺陷病毒-1前病毒载量
• 年，卷（期）: 2010,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-12
• 分类号: R512.91
• 字数: 2936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.23.004

摘要

目的 建立SYBR Green I荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用.方法 选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6 μg/ml～6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响.结果 所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101 Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6 ng/ml的 rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20 <rvMIP+AZT<rvMIP<T-20<AZT.结论 本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫雪梅	暨南大学药学院基因组药物研究所	29	63	5.0	6.0
2	孙晗笑	暨南大学药学院基因组药物研究所	61	266	7.0	13.0
3	闫莉	暨南大学药学院基因组药物研究所	3	5	1.0	2.0