TAT-p38(AF)融合肽的构建及其对紫外线诱导的p38 MAPK通路激活的抑制作用

• 作者: 刘亚伟 姜勇 张秀娟 王娟 邓鹏
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: p38丝裂原活化蛋白激酶 紫外线 蛋白转导域
• 年，卷（期）: 2010,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-21
• 分类号: Q291
• 字数: 2896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.19.007

摘要

目的 构建TAT蛋白转导域介导的p38(AF)MAPK蛋白转导系统,研究该蛋白转导系统对紫外线刺激引起的p38通路激活作用的影响.方法 将p38无活性突变体p38(AF)亚克隆至含有TAT蛋白转导域的pET-14b-TAT质粒,原核表达、纯化His-TAT-p38(AF)融合蛋白.激酶实验检测His-TAT-p38(AF)自身磷酸化作用.将该蛋白与NHI/3T3细胞孵育,Western blot法检测该蛋白的蛋白转导功能;紫外线照射后,检测内源性p38及其底物ATF2的磷酸化水平.结果 酶切、测序表明质粒构建正确;目的 蛋白被正确表达;His-TAT-p38(AF)融合蛋白无自身磷酸化作用;His-TAT-p38(AF)蛋白以浓度依赖性方式高效转导入细胞;His-TAT-p38(AF)的导入抑制紫外线诱导的内源性p38及其底物ATF2的磷酸化.结论 TAT蛋白转运系统能高效转导外源蛋白进入真核细胞;p38无活性突变体TAT-p38(AF)抑制紫外线诱导的p38 MAPK通路的激活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘亚伟	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	44	244	9.0	13.0
2	王娟	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	28	123	6.0	10.0
3	张秀娟		10	34	3.0	5.0
4	姜勇	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	72	377	8.0	17.0
5	邓鹏	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	19	65	5.0	7.0