含hTERT启动子、PE38KDEL片段质粒构建及其对人胰腺癌细胞凋亡的影响

• 作者: 孙晋津 李宝玉 陈剑秋
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺癌 人端粒酶反转录酶 启动子 铜绿假单胞菌外毒素 绿色荧光蛋白 基因疗法
• 年，卷（期）: 2010,（34）
• 页码范围: 4-6
• 分类号: R753.9
• 字数: 2481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.34.002

摘要

目的 构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并观察其对人胰腺癌MiaPaCa2细胞凋亡的影响.方法 采用PCR法构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并用双酶切法鉴定;将MiaPaCa2细胞分为5组,A组为空白对照组,仅加入含10% FBS的DMEM;B、C、D、E组分别转染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,采用TUNEL法检测MiaPaCa2细胞的凋亡指数.结果 重组质粒的PCR产物及酶切后片段的测序结果与GeneBank报道序列一致.A组转染24、48 h时MiaPaCa2细胞凋亡率分别为17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B组分别为18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C组为19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D组为29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E组为72.16%±4.79%、86.40%±7.71%.B～E组与A组比较,P均<0.05;E组与D组比较,P<0.05.结论 成功构建了含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,该质粒可促进人胰腺癌MiaPaCa2细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈剑秋		93	403	10.0	14.0
2	孙晋津		30	130	6.0	10.0
3	李宝玉		13	38	4.0	5.0