栝楼的RAPD-PCR体系建立与优化

• 作者: 宁志怨 廖华俊 曲益涛 江芹 董玲
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 医学
• 关键词: 栝楼 RAPD 分子标记 优化
• 年，卷（期）: 2010,（13）
• 所属期刊栏目: 经济作物与药用植物
• 页码范围: 7150-7152
• 分类号: R282.71
• 字数: 2701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.13.036

摘要

[目的]建立栝楼的RAPD-PCR体系并对该体系进行优化.[方法]以栝楼叶片为材料,采用CTAB法提取栝楼叶片基因组DNA,利用正交设计对RAPD-PCR体系进行优化.[结果]各因素水平变化对PCR反应影响大小依次为:Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物和dNTPs.通过试验分析,优化的栝楼RAPD反应体系为:在25 μl反应体系中,含10×buffer 2.5 μl,Mg2+ 2.0 mmol/L,Taq酶1 U,引物0 8 μmol/L,dNTPs 0.1 mmol/L.反应程序为94 ℃预变性2 mim;94 ℃变性30 s,37 ℃退火温度40 s,72 ℃延伸1.5 mim,36次循环;72 ℃延伸10 mim,4 ℃保存.[结论]该研究建立的栝楼RAPD反应体系稳定可靠,为栝楼性别鉴定、遗传多样性分析、亲缘关系分析等方面的研究提供了有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖华俊		59	421	11.0	17.0
2	江芹		39	256	8.0	14.0
3	董玲		48	314	9.0	15.0
4	宁志怨		23	176	7.0	12.0
5	曲益涛	安徽农业大学园艺学院	1	3	1.0	1.0