兔角膜缘上皮干细胞体外扩增及生物学鉴定

• 作者: 任王芳 刘小玲 叶宇峰 吴连宝 张方骅 张春芳 柯莉芹 莫链杰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 兔 角膜缘上皮干细胞 生物学特性 羊膜 角膜上皮移植片
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 174-178
• 分类号: R394.2
• 字数: 1833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.01.040

摘要

背景:角膜缘干细胞体外培养的关键在于建立稳定的体外培养体系,包括角膜缘干细胞的定位、培养条件、载体选择和鉴别方法等.目的:探索兔角膜缘上皮干细胞体外扩增方法,并对其生物学特性进行鉴定.方法:采用兔角膜缘组织块培养法,以人羊膜为载体,在体外进行兔角膜缘上皮干细胞原代和传代培养.倒置显微镜观察其体外生长特征;苏木精-伊红染色以及扫描电镜观察其形态;AE5和P63单克隆抗体免疫组织化学染色鉴定其蛋白表达.结果与结论:采用组织块培养法可在体外获得角膜缘上皮干细胞,能成功传代培养且保持较高增殖潜能.培养于去上皮羊膜上的干细胞可融合成片,呈"拉网"现象.原代角膜缘上皮干细胞AE5单克隆抗体染色阳性率低于5%,P63染色阳性达90%;随传代次数增加AE5染色阳性率增高,P63染色阳性率降低.结果显示兔角膜缘组织块培养法可以在体外成功获得角膜缘上皮干细胞,原代和传代细胞均具有干细胞特性,以羊膜为载体培养可形成角膜移植片.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小玲	杭州师范大学医学实验中心	12	63	4.0	7.0
2	叶宇峰	杭州市第一人民医院眼科	10	25	3.0	5.0
3	莫链杰	杭州师范大学临床医学院	3	15	2.0	3.0
4	吴连宝	杭州师范大学临床医学院	2	11	1.0	2.0
5	张方骅	杭州师范大学临床医学院	2	11	1.0	2.0
6	柯莉芹	杭州师范大学临床医学院	1	0	0.0	0.0
7	任王芳	杭州师范大学临床医学院	2	1	1.0	1.0
8	张春芳	杭州师范大学临床医学院	2	1	1.0	1.0