一种利用水提物快速简便检测烟草中TMV的方法

• 作者: 张帅 曹娜 李晓 杨金广 林北森 段燕平 王凤龙 王永 申莉莉 钱玉梅
• 来源期刊: 中国烟草科学
• 关键词: 烟草普通花叶病毒 快速检测 水提物
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 20-23
• 分类号: S431
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5119.2011.05.005

摘要

由烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)侵染所致的植物病毒病是世界性的难题,具有寄主广泛,易于传播等特点.笔者研究了一种快速简捷检测烟草中TMV的方法,通过利用无菌水研磨TMV侵染后发病的烟草病叶,取上清液进行1％的琼脂糖凝胶电泳检测,可检测到一条特异性的,大小为6 000 bp的电泳条带,而在健康烟草叶片水提物中却检测不到该电泳条带的存在.以TMV复制酶基因片段为探针,对该特异性电泳条带进行Northern-blotting分析.结果表明,水提物中的电泳条带与TMV复制酶基因探针发生较强的杂交信号,暗示该条带可能为TMV的基因组.因此,该方法可在10min内方便快速的检测烟株中TMV的存在,避免了常规血清学检测和分子检测(RT-PCR和western-blot)等方法的昂贵试剂和繁琐的操作步骤.但是该方法的水提取物在室温下不稳定,当静止3h以上,就很难再检测到特异性的电泳条带.