应用基因芯片技术检测人脐带血CD34+细胞体外扩增的巨核细胞基因表达

• 作者: 严力行 何吉 刘晋辉 吕杭军 朱发明 王芳 秦斐 陈舒
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨核细胞 基因表达 寡核苷酸序列分析 体外研究
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 170-174
• 分类号: R4
• 字数: 3989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2011.02.017

摘要

目的 研究人脐带血CD34+细胞体外扩增巨核细胞的基因表达,从分子水平探讨巨核细胞的表达机制.方法 采用密度梯度离心法和免疫磁珠分选系统获取人脐带血CD34+细胞.100 ng/ml TPO诱导培养12 d后,应用抗CD+41单克隆抗体免疫磁珠法分选巨核细胞.应用基因芯片技术检测巨核细胞、非巨核细胞和meg-01细胞株的基因差异表达.选择THBS1、HOXA9、β-actin、IL-8、ANXA6、FGF-8对检测结果进行RT-PCR验证.结果 巨核细胞样本与非巨核细胞样本比较,呈显著差异表达的基因有116个,其中52个上调,64个下调;巨核细胞样本与meg-01细胞株样本比较呈显著差异表达的基因有158个,其中71个上调,87个下调.THBSI在巨核细胞表达高于非巨核细胞,HOX A9在巨核细胞表达低于非巨核细胞;β-actin在巨核细胞与非巨核细胞的表达无差别.IL-8在巨核细胞表达高于meg-01细胞株;ANXA6在巨核细胞表达低于meg-01细胞株;FGF-8在巨核细胞与meg-01细胞株的表达无差别.结论 巨核细胞、非巨核细胞和meg-01细胞株基因表达存在显著差异,差异表达中的调控基因包括应激反应基因、免疫相关基因、DNA合成和修复基因、新陈代谢基因、肿瘤基因和肿瘤抑制基因等.