利用蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)EST数据库开发新的EST-SSRs标记.分析EST-SSRs的分布特征.利用SSRIT软件对NCBI上公布的285 285条蒺藜苜蓿EST序列进行SSR序列的检测.共检测出6688个SSR序列.分布于6512个EST中.占整个EST数据库的2.28%.其中二核苷酸重复基元出现的频率最高,占总EST-SSRs的34.4%(2301条).其次是三核苷酸重复基元,占29.6%(1982条).4~6核苷酸重复基元所占比例均较小.利用Primer Premier 5.0随机设计100对EST-SSRs引物.PCR扩增结果表明,85对引物在蒺藜苜蓿RIL群体亲本A17和A20上有清晰的扩增条带,占合成引物总教的85%.在RIL-8群体中检测到29个EST-SSRs引物有多态性,占可扩增引物的34.1%.本研究开发了85个蒺藜苜蓿ESrr-SSRs新标记.