人Wnt10b基因真核表达载体的构建及表达鉴定

• 作者: 李宇 林常敏 纪影畅 蔡湘娜
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: Wnt10b基因 载体 COS-7细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 196-199
• 分类号: R318
• 字数: 2809字
• 语种: 中文

摘要

目的:利用基因工程技术构建人Wnt10b基因的pEGFP-N1-Wnt10b真核表达载体,观察其在COS-7细胞中的表达.方法:以pUC19-Wnt10b为模板,PCR扩增人Wnt10b基因的cDNA编码区序列,扩增产物和pEGFP-N1载体双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pEGFP-N1-Wnt10b,酶切和测序鉴定该载体;Lipofectamine TM2000将该载体转染入COS-7中,Western blot和免疫细胞化学检测COS-7 Wnt10b蛋白表达.结果:PCR扩增出的人Wnt10b基因cDNA正确克隆到pEGFP-N1载体,成功构建了pEGFP-N1-Wnt10b;将其转染入COS-7,COS-7 Wnt10b蛋白表达明显增高.结论:成功构建了人pEGFP-N1-Wnt10b,这为进一步研究Wnt10b基因功能奠定了前期基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林常敏	汕头大学医学院组织学与胚胎学教研室	38	148	8.0	10.0
2	纪影畅	汕头大学医学院第一附属医院整形外科	37	182	9.0	12.0
3	李宇	汕头大学医学院第一附属医院整形外科	47	261	10.0	14.0
4	蔡湘娜	汕头大学医学院第一附属医院整形外科	23	151	8.0	11.0