应用HA、NA、M1和M2蛋白制备H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒

• 作者: 刘冰 周晓巍 夏炳辉 杨志新 杨津 王立强 许龙 陆健昇 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒 病毒样颗粒 杆状病毒
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 759-763
• 分类号: R373.13|Q78
• 字数: 4246字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.06.002

摘要

目的:应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础.方法:构建能共表达A/chicken/Jilin/2003 (H5N1)禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)、A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基质蛋白(M1)和离子通道蛋白(M2)的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒.经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性.结果:HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒；电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80 nm；血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性.结论:应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案.