RNA沉默G6PD对人结肠癌细胞HIF-1α表达的影响

• 作者: 张德太 张科 杨文 胡丽华
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: siRNA 低氧诱导因子1α 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 LoVo细胞
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1544-1548
• 分类号: R735.3
• 字数: 4331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.08.016

摘要

目的:研究siRNA干扰葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因表达的LoVo细胞在低氧环境中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)水平的变化及其对低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响.方法:构建靶向G6PD基因的siRNA干扰质粒载体,并转染人结肠癌细胞株(LoVo),用限制性内切酶法结合DNA测序鉴定特异重组子,RT-PCR检测G6PD mRNA表达,结合G6PD活性测定判断其干扰效率;以未转染LoVo细胞为对照,进一步观察G6PD沉默的瘤细胞在低氧环境下NADPH水平的变化,RT-PCR检测HIF-1α mRNA表达水平,Western blotting检测HIF-1α蛋白水平.结果:成功构建靶向G6PD的siRNA重组质粒载体并稳定转染LoVo细胞.与未转染组细胞相比,RNA干扰G6PD使mRNA表达下降43%,酶活性下降63.5%,细胞内NADPH水平显著下降(41% vs 100%,P<0.05),但HIF-1α mRNA表达水平无明显变化,而HIF-1α蛋白显著降低.结论:低氧环境下,G6PD基因可能通过下调NADPH水平从而降低HIF-1α的稳定性,导致其水平下降,进而影响肿瘤细胞的低氧反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡丽华	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	219	1037	13.0	23.0
2	张德太	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	44	314	10.0	16.0
3	杨文	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	13	225	6.0	13.0
4	张科	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	20	102	5.0	10.0