高分辨熔解曲线法检测非小细胞肺癌p53基因的突变

• 作者: 严红虹 吴一龙 安社娟 张绪超 牛飞玉 苏健 谢至 郭伟浜 陈剑光 陈志红
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: p53基因 突变 测序
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 767-773
• 分类号: R734.2
• 字数: 3392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2011.10.01

摘要

背景与目的 p53基因与人类多种肿瘤相关,突变型具有致癌作用,主要分布在外显子5-8.本研究旨在建立高分辨熔解曲线(high resolution melting,HRM)检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者p53基因突变的方法,探讨p53基因突变的特点及其在NSCLC发生发展中的演变规律.方法 采用HRM法检测264例NSCLC患者肿瘤组织和54例癌旁肺组织p53基因外显子5-8的突变,突变样品进一步使用PCR产物直接测序法分析确定突变类型;HRM法检测阳性而PCR产物直接测序法检测阴性的样品,进一步进行亚克隆测序证实.结果 54例对照未发现突变.264例肿瘤组织中,HRM法检出 p53基因突变104例,102例得到PCR产物直接测序法证实,突变率为39.4%;95例为点突变,7例为碱基插入和缺失导致的移码突变.p53外显子5-8的突变率分别为11.7%、8%、12.5%和10.6%,差异无统计学意义(P=0.35).p53基因突变与性别有关,与其它临床病理特征无关.结论 HRM法筛选p53基因突变样品,具有操作简便、快速、敏感、单管避免污染等优点,值得推广.p53基因的突变特点提示,p53基因突变是自发性突变,可能是DNA合成和修复过程中的随机错误所致.