猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白间接ELISA方法的建立

• 作者: 左健 徐志文 朱玲 李小欢 林华 王印 郭万柱 韩存波
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征 重组N蛋白 ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 17-21
• 分类号: S858.28
• 字数: 4066字
• 语种: 中文

摘要

用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳(N)蛋白作为包被抗原,建立了PRRSV抗体检测的间接ELISA方法,并优化确定了ELISA最佳工作条件:重组抗原包被浓度为13.3 μg/mL,37℃1h或4℃过夜；5％脱脂乳37℃封闭2h;血清1:40稀释,37℃作用90 min；酶标二抗1∶4000稀释,37℃作用40 min；底物TMB溶液37℃显色15 min；统计学分析后确定阴阳性的临界值为0.434.与美国IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒相比较,其相对特异性和敏感性分别为93.0％和95.6％,符合率达到94.7％,检测结果无显著性差异.