烟曲霉pbs2基因在热应激与胞壁应激的双重应激中的作用

• 作者: 万喆 刘伟 季雅娟 李若瑜 阳芳
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: pbs2 烟曲霉 热应激 胞壁刺激
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22
• 分类号: R379.6
• 字数: 2798字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-3827.2011.04.002

摘要

目的 通过研究烟曲霉对细胞壁合成干扰物质及棘白菌素类药物的敏感性、烟曲霉在受热应激后HOG通路成分的表达变化探讨pbs2基因在热应激和胞壁应激的双重应激中的作用.方法 烟曲霉野生株AF293和pbs2突变株在含钙荧光白(Calcofluor white,CFW),刚果红(Congo red,CR)和十二烷基硫酸钠(Sodium dodecylsulfate,SDS)的葡萄糖酵母浸液琼脂(Yeast Agar Glucose,YAG)上生长,观察其对上述3种细胞壁合成干扰物质的敏感性.微量液基稀释法检测烟曲霉对米卡芬净和卡泊芬净的敏感性.实时荧光定量PCR法分析AF293受到热刺激前后菌体pbs2和hig1的RNA含量变化.结果 50℃培养时pbs2突变株对胞壁合成干扰物质的敏感性较野生株AF293增强,600 μg/mL CFW,400 μg/mL CR及100 μg/mLSDS完全抑制pbs2突变株生长,不能完全抑制AF293的生长；在37℃培养时,AF293和pbs2突变株敏感性没有差异.50℃培养时,卡泊芬净和米卡芬净对AF293和pbs2突变株的最低有效浓度(Minimum effective concentration,MEC)均为0.25 μg/mL,但pbs2突变株在药物浓度为0.5μg/mL作用时生长完全受抑制,而野生株仍生长；在35℃和42℃培养时,AF293和pbs2突变株对两种药物的敏感性没有差异,MEC均为0.5 μg/mL.50℃热应激后,AF293的pbs2和hog1的RNA表达量分别下降至37℃时的3%和13%；pbs2突变株的hog1降至应激前的35%.结论 烟曲霉受热应激和胞壁应激的双重应激时,pbs2基因参与细胞适应反应,发挥保护作用.