地芽孢杆菌属DYth03 DNA聚合酶基因的克隆、表达及性质分析

• 作者: 徐丽美 李侃 罗淑娅
• 来源期刊: 台湾海峡
• 学科: 生物学
• 关键词: 海洋生物学 嗜热菌 地芽孢杆菌属(Geobacillus) 16S rDNA 耐热DNA聚合酶 基因表达 东太平洋
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 17-20
• 分类号: Q7
• 字数: 3614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1000-8160.2011.01.003

摘要

从东太平洋热液区E53站位的深海沉积物样品中分离出1株能在65℃生长的嗜热菌(DYth03).该菌的16S rDNA序列与地芽孢杆菌属(Geobacillus)内各种之间的同源性为98%以上.克隆得到DYth03的DNA聚合酶基因(DYth-pol),序列分析表明该基因全长为2 631 bp,G+C含量为55.5%,推测编码为876个氨基酸,与Bst DNApolI的同源性最高(达98%).将该聚合酶基因克隆到pTTQ-h表达载体上,并在大肠杆菌DH1中进行表达.对纯化到的表达产物进行酶活性测定,结果表明该酶具有聚合酶活性和5'-3'外切酶活性.