突触后致密物蛋白质95基因沉默及对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为的干预

• 作者: 刘薇 李旭 申乐 虞雪融 许力 黄宇光
• 来源期刊: 协和医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经病理性疼痛 突触后致密物蛋白质95 谷氨酸兴奋性中毒 Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白质激酶Ⅱα 慢性压迫损伤 小干扰RNA
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 343-349
• 分类号: R34|R363.1
• 字数: 5268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9081.2011.04.012

摘要

目的 评估小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对突触后致密物蛋白质95(postsynaptic density protein 95,PSD-95)基因的沉默效率及PSD-95基因沉默对谷氨酸诱导的神经细胞毒性与信号转导的影响,观察用RNA 干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默大鼠脊髓PSD-95基因治疗神经病理性疼痛的效果.方法 用神经母细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞(NG108-15细胞)筛选大鼠PSD-95基因特异的siRNA,并用谷氨酸刺激PSD-95基因沉默的NG108-15细胞,检测细胞生长活力与信号通路蛋白质表达与磷酸化的改变.建立大鼠神经病理性疼痛的坐骨神经慢性压迫(chronic constriction injury,CCI)模型,预防性及治疗性鞘内给予PSD-95siRNA,留取脊髓标本,实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)分析PSD-95 mRNA表达水平,并测定大鼠后足机械痛阈及热痛阈的变化.结果 序列特异性最高的siRNA在最佳转染条件下使PsD-95基因表达水平下降91.5％；PSD-95基因沉默既可增强神经细胞对谷氨酸毒性的耐受能力,又可抑制Ca2/钙调蛋白依赖的蛋白质激酶Ⅱα (CaMKⅡα)异构型磷酸化.正常大鼠鞘内注射PSD-95 siRNA可降低大鼠脊髓背角PSD-95 mRNA的表达水平38％ (P ＜0.05),但对痛阈无显著影响；CCI模型大鼠鞘内注射PSD-95 siRNA可明显缓解神经病理性疼痛.结论 PSD-95基因在神经病理性疼痛的发生中起重要作用.鞘内注射PSD-95 siRNA可以显著缓解CCI模型大鼠机械性和热痛觉过敏,PSD-95 siRNA可能成为有效控制神经病理性疼痛的基因治疗方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄宇光	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科	207	1951	22.0	35.0
2	刘薇	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科	30	47	3.0	5.0
3	虞雪融	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科	37	203	8.0	12.0
4	许力	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科	16	88	7.0	8.0
5	李旭	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科	11	40	3.0	6.0
6	申乐	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科	40	204	8.0	12.0