SV40PolyA顺式活化基因元件中不完整茎环结构的发现和序列研究

• 作者: 吕占军 张媛 张彬 景向阳 李珠 王红钢 马欢
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 非编码序列 GFP 茎环结构 Alu SV40PolyA
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 337-346
• 分类号: Q78
• 字数: 6093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2011.00337

摘要

研究室的前期工作发现,Alu串连序列插入pEGFP-C 1质粒的GFP基因下游,瞬时转染HeLa细胞抑制GFP基因表达,2F2R(来自SV40PolyA反序5'端的第2个60 bp)插入GFP和Alu串连序列之间可以解除Alu序列对GFP基因的抑制作用.文章通过删减2F2R发现,45R(2F2R 5'端的45 bp).30R和22R可以活化基因,且二串连体活化基因作用高于单体.Secloop(2F2R近中部的22bp)和Poly4(2F2R 3‘端的30 by)不能活化墓因.30R与Poly4用9碱基连接形成30R-Poly4,其活化基因作用低于2F2R,两个22R之间连接碱基数对活化GFP墓因作用没有明显的影响.22R(5'-GTGAAAAAAATGCTTTATTTGT 3')含有不完整的回文序列,可以形成不完整的茎环结构,包括一个3碱基loop.3 by第一茎、2碱基泡和3 by第二茎.改变22R茎环结构的碱基突变明显影响其活化GFP基因的作用,过多互补和过少互补的茎环结构均不利于活化基因,提示适当的不完整茎环结构与活化基因有关.