实时荧光定量聚合酶链反应检测血清2型猪链球菌的研究

• 作者: 叶长芸 孙晖 张少敏 白雪梅
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 猪链球菌 Real-time PCR TaqMan-MGB探针
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 176-178
• 分类号: R85.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/.j.issn.1003-9961.2011.03.004

摘要

目的 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(Real.time PCR)技术,建立针对血清2型猪链球菌的快速检测方法.方法 针对血清2型猪链球菌的csp2J基因序列,应用Beacon Designer 7.0,设计了引物和TaqMan-MGB探针,建立Real-time PCR检测方法;把目的 片段克隆到pMD18-T载体制作标准曲线;以常见致病菌及条件致病菌验证引物探针的特异性;制备血液模拟标本评价本方法在临床标本中的应用.结果 由标准曲线可知该方法可以检测到100拷贝/反应体系的目的 基因,特异性检测显示只有血清2型猪链球菌有荧光信号,其他常见致病菌及条件致病菌均无荧光信号,血液模拟标本中3.9×10<'2>cfu/ml的细菌含量可被检出.结论 以csp2J为目的 基因建立的血清2型猪链球菌Real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性好、快速,可用于临床感染患者标本的初步筛查.