抗猪甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备与特性分析

• 作者: 乔传玲 唐续 张健 杨焕良 辛晓光 陈化兰 陈艳
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甲型H1N1猪流感病毒 HA MAb
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 711-716
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4146字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在制备猪甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)蛋白的特异性单克隆抗体.采用RT-PCR方法扩增猪甲型H1N1流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pCAGGS上,获得重组质粒pCAGGS-HA,转染293T细胞,通过间接免疫荧光(IFA)检测表明HA蛋白在293T细胞中得到表达.将pCAGGS-HA以100 μg·只-1剂量免疫5周龄BALB/c小鼠,获得4株稳定分泌抗HA蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为11G7、3C10、3G3和2B11.其中11G7诱导小鼠产生的腹水HI效价为14log2,中和效价为1:8 192,HI试验结果进一步表明11G7只与甲型H1N1流感病毒发生反应,而不与其他H1N1、H1N2、H3N2、H5N1及H9N2亚型流感病毒反应.该MAb的制备将为建立猪甲型H1N1流感病毒与传统亚型SIV的鉴别诊断方法奠定基础.