空肠弯曲菌AhpC蛋白的克隆表达及抗原性分析

• 作者: 乔博 孟凡亮 张建中 张茂俊 曹芳芳
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 空肠弯曲菌 克隆表达 AhpC 抗原性
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 909-913
• 分类号: R378
• 字数: 4244字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.10.012

摘要

目的 构建空肠弯曲菌烷基过氧化氢还原酶(ah pC)基因的原核表达系统,克隆表达AhpC蛋白,用Western blot以及ELISA方法检测表达蛋白的抗原性,为筛选空肠弯曲菌感染后特异性抗体检测试剂的制备奠定基础.方法 用PCR方法从中国分离菌株ICDCCJ07001的染色体DNA中扩增出ah pC基因,将目的基因插入表达载体pGEX-4T-1后转化入大肠杆菌E.coliBL21( DE3),IPTG诱导重组质粒pG EX-ah pC的表达.SDS-PAGE分析表达产物,采用GST标签亲和层析柱纯化表达蛋白.应用兔免疫血清、临床感染者血清以及健康无感染者血清,利用Western blot以及ELISA的方法分析AhpC蛋白的抗原性并初步评价其在ELISA检测方法中的应用.结果 PCR扩增及双酶切鉴定证实重组质粒构建成功.重组表达蛋白经飞行质谱鉴定为空肠弯曲菌AhpC蛋白,Western blot及ELISA检测结果显示AhpC具有特异抗原性.结论 成功构建了ah pC重组表达载体pGEX-4T-1/ahpC,并在大肠杆菌中高效表达.空肠弯曲菌AhpC蛋白具有抗原性,可以作为空肠弯曲菌感染后血清抗体检测的特异抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建中	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	140	649	13.0	18.0
2	孟凡亮	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	19	36	4.0	5.0
3	张茂俊	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	19	73	4.0	8.0
4	乔博	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	4	4	2.0	2.0
5	曹芳芳	北京协和医学院公共卫生学院	1	2	1.0	1.0