人超氧化物歧化酶-胸腺素α1融合蛋白在毕赤酵母中的表达与活性检测

• 作者: 吕红 周宇飞 周峻岗 袁汉英
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胸腺素α1 人超氧化物歧化酶 融合蛋白 Ni-NTA亲和层析纯化 活性测定
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学与工程
• 页码范围: 178-184
• 页数: 7页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文

摘要

为了增强胸腺素α1(Thyα1)的稳定性和免疫功能,采用胸腺素α1与人超氧化物歧化酶(hSOD)融合的策略,构建了6HishSOD-(G4S)1-Thyα1和6His-hSOD-(G4S)2-Thyα1 2个融合基因,并分别在毕赤酵母中实现了高水平表达.重组表达的融合蛋白经过Ni-NTA亲和层析纯化后,纯度达到80%以上.用邻苯三酚自氧化法和E-玫瑰花法分别测定了人超氧化物歧化酶酶活性和胸腺素活性.结果表明,融合蛋白6His-hSOD-(G4S)1-Thyα1和6His-hSOD-(G4S)2-Thyα1的超氧化物歧化酶比活性分别为120 998±5 206 U/mg和31 279±1 121 U/mg;融合蛋白在1×10-7mol/L浓度下的E玫瑰花结率分别为(38.4±1.6)%和(36.6±0.2)%.结果说明:融合蛋白中由5个氨基酸G4S构成的连接肽能有效地保障2个蛋白质各自的结构特征,使融合蛋白既有超氧化物歧化酶的活性,又具有胸腺素的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁汉英		11	57	5.0	7.0
2	周峻岗		10	33	3.0	5.0
3	吕红		30	130	6.0	10.0
4	周宇飞		2	19	1.0	2.0