荧光定量PCR检测猪圆环病毒2型方法的研究与应用

• 作者: 李志娟 杨霞 王川庆 王永生 赵军 陈陆
• 来源期刊: 扬州大学学报(农业与生命科学版)
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 荧光定量PCR 复制 病毒滴度
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 49-54
• 分类号: S852.65+9.2
• 字数: 3943字
• 语种: 中文

摘要

利用常规PCR扩增出猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2保守区域276 bp片段,将其克隆到pMD-18载体,以pMD-18T-276质粒DNA作为标准质粒模板优化反应条件,建立定量检测PCV2的荧光定量PCR方法.结果表明:Ct值与标准品模板在5.60×101～2.74×109拷贝·μL-1范围内呈良好的线性关系,相关系数为-1.00,斜率为-3.345.所建立的方法与猪1型圆环病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖障碍与呼吸系统综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒均无交叉反应.应用该方法对PCV2感染细胞后的复制情况进行了研究,结果显示在感染细胞96 h时,PCV2复制达到最高点.此外,利用建立的方法对保存的11个分离株在PK15细胞上繁殖特性进行了研究,筛选到4株高滴度毒株,丰富了圆环病毒疫苗株的研究资源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵军	河南农业大学牧医工程学院	62	259	9.0	13.0
2	王川庆	河南农业大学牧医工程学院	198	1212	16.0	27.0
3	杨霞	河南农业大学牧医工程学院	151	817	16.0	24.0
4	陈陆	河南农业大学牧医工程学院	134	819	13.0	22.0
5	李志娟	河南农业大学牧医工程学院	3	26	3.0	3.0
6	王永生	河南农业大学牧医工程学院	6	61	4.0	6.0