大苞鞘石解原球茎玻璃化超低温保存技术的研究

• 作者: 吴元玲 申晓辉
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 大苞鞘石斛 原球茎 玻璃化 超低温保存
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 279-287
• 页数: 9页
• 语种: 中文

摘要

本文研究建立了大苞鞘石斛(Dendrobium wardianum Warner)原球茎玻璃化法超低温保存的技术体系.结果发现,预处理和玻璃化溶液(plant vitrification solution 2,PVS2)装载脱水是影响大苞鞘石斛原球茎相对存活率的两个关键步骤,高渗与低温一高渗两种预处理方法测定的相对存活率具有显著性差异;玻璃化溶液的种类以及脱水时间对冻后存活率具有重要的影响.基于此,建立了大苞鞘石斛原球茎的超低温保存体系,即:以继代培养60 d的大苞鞘石解原球茎为材料,1/2MS+0.8 mol/L蔗糖的培养基上4℃低温预处理6d后,转至1/2 MS+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖的装载液中室温下装载40 min,在0℃下装载PVS2脱水40 min,然后转入装有新鲜PVS2冷冻管中并迅速投入液氮.在液氮保存1h后放在40℃水浴中快速解冻1 min,利用含1.2 mol/L蔗糖的1/2MS培养液洗涤3次,每次间隔10 min;待恢复培养30d后统计存活率,可使大苞鞘石斛原球茎超低温保存后存活率达到20.0%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	申晓辉		31	234	9.0	14.0
2	吴元玲		1	0	0.0	0.0