室间隔缺损胎儿心室肌组织微小RNAs时序性表达差异研究

• 作者: 余章斌 朱春 董小玥 邱玉芳 郭锡熔 陈玉林 韩树萍
• 来源期刊: 中国循证儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 室间隔缺损 胎儿 微小RNAs 差异表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 368-375
• 分类号: R714.5
• 字数: 5420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5501.2011.05.011

摘要

目的 采用微小RNAs(miRNAs)表达谱芯片分析不同孕龄(孕早期与孕中期)室间隔缺损(VSD)胎儿心室肌组织中时序性表达差异的miRNAs.方法 连续性纳入2009年7～12月南京医科大学附属南京妇幼保健院因病理因素流产经解剖证实为VSD且不合并其他畸形的胎儿为VSD组.以同期因生理性难免流产,并经解剖证实无心脏畸形和其他器官畸形的胎儿为对照组,依据孕龄与VSD组1:1匹配.根据孕龄,将VSD组和对照组分别分为孕早期亚组和孕中期亚组.采用Agilent Human 2.0 miRNAs表达谱芯片观察胎儿心室肌组织miRNAs表达变化,芯片数据采用生物信息学方法进行分析,包括差异miRNAs筛选,预测miRNAs靶基因Gene Ontology分析,靶基因信号通路分析,并采用实时PCR法验证芯片结果.结果 VSD组和对照组各纳入6例,两组孕早期亚组和孕中期亚组均各3例.①通过差异miRNAs筛选,发现孕早期VSD亚组与孕中期VSD亚组间有33个时序性表达差异的miRNAs.19个miRNAs在孕早期VSD亚组表达上调,在孕中期VSD亚组表达下调;14个miRNAs在孕早期VSD亚组表达下调,在孕中期VSD亚组表达上调.②生物信息学预测到2 761个靶基因,大部分miRNAs的靶基因中含有与心脏发育直接相关的关键基因(TBX5、GATA4、TBX1和NKX2-5等).③靶基因Gene Ontology分析表明其中与细胞进程、代谢过程和生物调控相关的靶基因分别占整个靶基因数量的23.5%、18.3%和17.7%.④靶基因信号通路分析发现,WNT信号通路中的靶基因在孕早期VSD亚组与孕中期VSD亚组中存在时序性差异.⑤随机挑选孕早期VSD亚组与孕中期VSD亚组时序性表达差异的4个miRNAs(hsa-miR-19a、hsa-let-7e、hsa-miR-134和hsa-miR-206)进行验证,定量PCR结果显示,孕早期VSD亚组分别上调3.2(hsa-miR-19a)和4.1倍(hsa-let-7e),下调5.3(hsa-miR-134)和4.4倍(hsa-miR-206);孕中期VSD亚组分别下调4.8(hsa-miR-19a)和3.4倍(hsa-let-7e),上调4.5(hsa-miR-134)和3.9倍(hsa-miR-206).结论 时序性表达差异的miRNAs在胎儿VSD畸形的发生中可能起着重要作用,但本研究样本量较小,需要进一步扩大样本量进行验证.这些差异表达miRNAs的预测靶基因与细胞发育、分化和代谢密切相关,含有与心脏发育直接相关的关键基因,部分靶基因为WNT信号通路中的关键因子,提示VSD的发生发展是机体在miRNAs的参与下,在多个层面上使基因表达失控的共同结果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭锡熔	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	220	1261	16.0	21.0
2	余章斌	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	88	841	16.0	24.0
3	韩树萍	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	86	893	17.0	24.0
4	陈玉林	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	24	240	9.0	15.0
5	邱玉芳	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	24	303	10.0	16.0
6	董小玥	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	16	227	9.0	15.0
7	朱春	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	15	86	5.0	9.0