siRNA沉默EphB2表达对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 李玲 欧阳华强 潘战宇 谢广茹 陈冲
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EphB2:RNA干扰 胰腺癌 CFPAC-1细胞 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 605-610
• 分类号: R735.9|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2011.06.004

摘要

目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,靶向沉默人胰腺癌CFPAC-1细胞中的EphB2基因的表达,观察EphB2对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:构建靶向EphB2基因的siRNA干扰质粒,通过LipofectamineTM2000将干扰质粒转染进293T细胞,筛选出能有效抑制EphB2蛋白表达的干扰序列.构建含有效序列的慢病毒载体pLentiGFP-EphB2,感染CFPAC-1细胞,筛选出稳定干扰EphB2蛋白表达的CFPAC-1细胞系.定量PCR、Western blotting检测CFPAC-1细胞中EphB2mRNA和蛋白的表达,CCK8法和流式细胞术检测EphB2下调对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响.结果:成功构建了EphB2慢病毒干扰载体pLentiGFP-EphB2,获得稳定转染pLentiGFP-EphB2的CFPAC-1细胞(CFPAC-1 EphB2 RNAi).CFPAC-1EphB2 RNAi细胞中EphB2 mRNA和蛋白表达较空载体组显著降低,EphB2 mRNA的沉默效率为63％.与空载体组和未转染组相比,pLentiGFP-EphB2感染显著促进CFPAC-1细胞的增殖(1.89±0.17 vs l.63 ±0.13、1.71 ±0.22,P＜0.05),抑制细胞的凋亡[(7.02±1.27)％vs(13.37±1.89)％、(15.71±2.35)％,P＜0.05].结论:pLentiGFP-EphB2可有效下调胰腺癌CFPAC-1细胞中EphB2的表达,促进CFPAC-1细胞增殖和抑制其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢广茹	天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科	15	218	7.0	14.0
2	潘战宇	天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科	4	16	2.0	4.0
3	陈冲	天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科	2	2	1.0	1.0
4	欧阳华强	天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科	1	0	0.0	0.0
5	李玲	天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科	1	0	0.0	0.0