超声波破碎-高效液相色谱法定量检测核酸

• 作者: 王晶 盛灵慧 董莲华 黎朋
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 质粒 超声波破碎 高效液相色谱 荧光 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1442-1446
• 分类号: O629.7|O657.72
• 字数: 4253字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1096.2011.01442

摘要

采用超声波破碎结合高效液相色谱技术,建立了定量检测质粒DNA的方法,测量结果可以溯源至核苷酸标准物质.采用超声波破碎(功率300 W,频率24 kHz)技术将质粒DNA破碎成200～500 bp的小片段DNA,再用蛇毒磷酸二酯酶将其水解为4种核苷酸(dCMP:3.2 min；dTMP:4.7 min; dGMP:5.3 min,dAMP:6.8 min),将产物通过HPLC分离后,采用外标法进行定量分析.应用此方法对待测质粒pNK603进行定量分析,测定的4种核苷酸的摩尔百分比(A∶T= 0.95,C∶G=0.98)与理论值接近.本方法的测定结果(47.24 μg/g)与实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR,45.98 μg/g)和PicoGreen荧光染料法(46.02 μg/g)的测定结果没有显著差异,表明建立的超声波-HPLC方法可以应用于质粒DNA的定量分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晶		107	406	10.0	15.0
2	盛灵慧		23	138	6.0	11.0
3	黎朋		9	21	3.0	4.0
4	董莲华		26	121	6.0	9.0