三角紫叶酢浆草ISSR反应体系的建立与优化

• 作者: 王永清 胡甦 陶炼
• 来源期刊: 草业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 三角紫叶酢浆草 ISSR 反应体系
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 142-150
• 分类号: Q946-33|Q949.752.1
• 字数: 6266字
• 语种: 中文

摘要

采用正交设计直观分析法,对影响三角紫叶酢浆草ISSR- PCR反应较大的5个因素(Mg2+、Taq酶、引物、模板DNA、dNTP)在5个水平上进行优化实验；从100个随机引物中筛选出适宜的引物,并筛选出其最佳退火温度；最后对反应程序进行优化.由此首次建立了适合三角紫叶酢浆草的ISSR- PCR反应体系:25 μL反应液中含10×buffer 2.5 μL,Mg2+ 1.25 mmol/L,Taq酶0.9U,引物0.3 μmol/L,模板DNA 60～100 ng,dNTP 0.25 mmol/L.反应程序为:94℃预变性5 min; 94℃变性50 s,退火时间60 s(根据不同引物选择对应最佳退火温度),72℃延伸1.5min,循环40次；72℃延伸7 min,4℃保存.这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术研究酢浆草属植物提供理论依据和技术参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永清	四川农业大学园艺学院	86	1086	18.0	29.0
2	陶炼	四川农业大学园艺学院	7	62	6.0	7.0
3	胡甦	四川农业大学林学院	2	32	2.0	2.0