伴放线放线杆菌细胞致死性扩张毒素的细胞毒性研究

• 作者: 徐艳 李璐 杨迷芳 段君兰
• 来源期刊: 牙体牙髓牙周病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 伴放线放线杆菌 细胞致死性扩张毒素 中国仓鼠卵巢细胞 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 181-186,199
• 页数: 7页
• 分类号: R780.2
• 语种: 中文

摘要

目的:体外诱导表达伴放线放线杆菌(Aqqregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)细胞致死性扩张毒素(cytolethal distending toxin,CDT),观察其对中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)和人宫颈癌上皮细胞(HeLa cell)的毒性作用.方法:诱导重组蛋白Aa CdtA、CdtB、CdtC的体外表达,采用镍亲和层析柱法纯化目的蛋白,体外重构Aa CDT全毒素.通过体外酶活性实验检测重组蛋白CdtB的生物学活性,并通过细胞克隆形成实验(Colony-forming experiment)及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diphe nyltetrazolium bromide,MTT]比色法进一步观察CDT对CHO细胞和HeLa细胞的毒性作用.结果:由重组蛋白Aa CdtA、CdtB、CdtC体外重构获得的Aa CDT全毒素不仅抑制CHO细胞增殖,导致CHO细胞克隆形成单位(Colony-Forming Unit,CFU)数目减少甚至消失.也可抑制He-La细胞增殖并引起包括细胞体积增大及细胞核增大增多的细胞形态学改变,并且此增殖抑制作用呈浓度依赖性.结论:体外成功构建了具有生物学活性的Aa CDT全毒素,且Aa CDT毒性发挥需要三个亚基CdtA、CdtB、CdtC同时存在并构成三聚体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李璐		27	67	5.0	6.0
2	段君兰		3	5	1.0	2.0
3	杨迷芳		8	16	3.0	3.0
4	徐艳		84	297	9.0	13.0