猪阴沟肠杆菌16SrRNA甲基化酶耐药基因分析

• 作者: 刘健华 张俊丰 曾振灵 陈杖榴 陈琳 魏冬霞 黄东璋
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 阴沟肠杆菌 16SrRNA甲基化酶 耐药 rmtB
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 167-175
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.01.020

摘要

[目的]分析猪阴沟肠杆菌GZL41B中4种质粒介导的16SrRNA甲基化酶耐药基因及其水平传播方式;[方法]采用PCR及序列分析方法检测鉴定猪阴沟肠杆菌中16SrRNA甲基化酶耐药基因.以大肠杆菌E.coli Rif+488(耐利福平)为受体菌进行接合试验研究16SrRNA甲基化酶耐药基因的水平传播方式.用微量稀释法测定原菌株及其接合子对18种抗菌药物的敏感性.用PCR及序列测定法分析比较来自同一猪腹泻直肠拭子阴沟肠杆菌GZL41B和大肠杆菌GZL41H的侧翼序列并对172株动物源大肠杆菌中16SrRNA甲基化酶耐药基因流行情况进行调查.[结果]从阴沟杆菌中成功扩增出目的片段,该片段经限制性内切酶HindⅢ酶切后,出现与预期的531 bp和194 bp相符的两段片段,序列测定结果证实该基因为rmtB,GenBank登录号为EF017943.以E.coli Rif+488(耐利福平)为受体菌,成功地获得了接合子,该接合子经鉴定为大肠杆菌.原菌株和接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素等4,6-二脱氧链霉胺类高度耐药,其MIC均≥256 μg·mL-1.大肠杆菌GZL41H中,rmtB的上游为Tn3转座子的部分序列,下游为肠炎沙门氏菌基因岛SGI1上融合酶编码基因groEL/intI1的部分序列orf1,而来源相同的阴沟肠杆菌GZL41B未扩增到与大肠杆菌GZL41H相同的侧翼序列.172株动物源大肠杆菌中,25株菌(15%)检出rmtB,1株菌(0.6%)检出armA;[结论]16SrRNA甲基化酶耐药基因rmtB首次出现在猪阴沟肠杆菌中,该基因介导猪阴沟肠杆菌对4,6-二脱氧链霉胺类氨基糖苷抗生素的高度耐药,并能通过接合方式在不同种属细菌间进行传播.rmtB在阴沟肠杆菌和大肠杆菌中传播的遗传背景存在差异.动物源大肠杆菌中rmtB广泛流行.