一种快速高效制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法

• 作者: 何欣怡 何永强 何祥康 李光才 蔡顺风 邱海洪 鲁兴萌
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕微孢子虫 核酸 蛋白 提取方法 珠磨式研磨器 双向电泳
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1019-1024
• 分类号: Q959.115+.92|S884.2+1
• 字数: 5361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2011.06.008

摘要

家蚕微孢子虫孢子壁坚厚不易破碎,并对许多化学物质有很强的抵抗性,使用常规的核酸和蛋白抽提方法效果不够理想.研究建立玻璃珠破碎法快速制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法,采用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析所得DNA的完整性和所得总蛋白的差异性,并对提取蛋白进行双向电泳试验.结果表明:使用玻璃珠破碎法对微孢子虫孢子壁的破碎率可达到90％以上,基因组DNA得率约为7.65 fg/粒,总蛋白得率约为788.3fg/粒,均显著高于常用的发芽法和液氮冻融研磨法的得率.双向电泳结果显示玻璃珠破碎法能有效提取家蚕微孢子虫总蛋白,经考马斯亮蓝染色可检测到约350个蛋白点,蛋白信息丰富,可进一步用于质谱分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁兴萌	浙江大学蚕蜂研究所	91	1101	20.0	28.0
2	李光才	浙江大学蚕蜂研究所	3	39	3.0	3.0
3	何永强	浙江出入境检验检疫局技术中心	12	95	6.0	9.0
4	邱海洪	浙江大学蚕蜂研究所	7	52	5.0	7.0
5	蔡顺风	浙江大学蚕蜂研究所	6	46	4.0	6.0
6	何欣怡	浙江大学蚕蜂研究所	3	28	2.0	3.0
7	何祥康	浙江大学蚕蜂研究所	2	28	2.0	2.0