日本血吸虫mago nashi基因的克隆表达及其功能研究

• 作者: 傅志强 刘金明 彭金彪 林矫矫 洪炀 王欣之 石耀军 韩宏晓
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 mago nashi基因 克隆表达 免疫保护效果
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 11-15,35
• 分类号: R532.21
• 字数: 5127字
• 语种: 中文

摘要

以日本血吸虫18 d虫体的cDNA为模板,PCR获得影mago nashi编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为441 bp,将该序列提交至NCBI,登录号为GQ403668；应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况.结果表明:该基因在不同发育阶段均有表达,在13日龄童虫表达量相对最高,32日龄次之；在不同性别成虫虫体中,该基因在雄虫的表达量远高于雌虫,说明该基因为日本血吸虫性别发育差异基因.以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌中表达,表达产物分子质量为19.5 ku,并以Ni-NTA HisBind Resin纯化重组蛋白.Western blotting试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得25.94%的减虫率和30.01%的肝脏减卵率.