5-Aza-CdR对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株中RASSF1A基因表达的影响

• 作者: 姜蕊 宋伟 赵春明
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 5-Aza-CdR RASSF1A 视网膜母细胞瘤 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 24-27
• 页数: 4页
• 分类号: R774.1
• 字数: 5050字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR对人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株中RASSFIA基因启动子区域甲基化状态及其表达的影响.方法 不同浓度的5-Aza-cdR对HXO-RB44细胞进行化学干预72 h后用无药物完全培养基培养72 h,MTT法检测不同浓度5-Aza-CdR时于HXO-RB44细胞的生长抑制率;甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测RASSFIA基因启动子区域甲基化状态的改变;RT-PCR观察RASSFIA基因mRNA水平变化;Western blot检测RAsSF1A蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期以及凋亡.结果 0.5 μmol·L-1、1.0 μmol·L-1、2.0μmol·L-1和5.0 μmol·L1的5-Aza-CdR对HXO-RB44细胞的生长抑制率分别为(9.37±3.53)%、(25.72±2.35)%、(39.88±4.32)%和(76.50±0.94)%,各组之间差异具有统计学意义;经5-Aza-CdR干预后,RASSF1A基因启动子区域由高甲基化状态转变为非甲基化状态,仅0.5 μmol·L-15-Aza-Cd就可逆转RASSF1A基因的高甲基化状态;RT-PCR和Western blot结果 显示在干预组细胞中分别出现RASSFIA基因的DNA条带(329 bp)和蛋白质条带(相对分子质量39×10-3),而对照组中没有相应条带出现;各组之间RASSF1A mRNA以及蛋白的表达差异均具有显著性统计学意义;流式细胞术显示药物处理后细胞周期出现G0/G1期阻滞,并出现显著的细胞凋亡.结论 DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR能够诱导RASSF1A基因启动子区域去甲基化,并通过该机制诱导RASSF1A基因在人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋伟	山东大学附属省立医院肿瘤治疗中心	53	400	6.0	18.0
2	姜蕊	山东大学附属省立医院肿瘤治疗中心	7	24	4.0	4.0
3	赵春明	山东大学附属省立医院眼科	4	12	2.0	3.0