农杆菌介导的CFL(Cucumber-FLO-LFY)基因遗传转化大岩桐

• 作者: 叶丹 吴志毅 张明哲 张晓峰 朱睦元 王利琳 边红武 陈曦 韩凝
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: CFL(Cucumber-FLO-LFY)基因 转基因大岩桐 农杆菌介导
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 455-461
• 分类号: S513.03
• 字数: 4672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn. 1674-7968.2011.03.008

摘要

建立和优化了农杆菌(A grobacterium tumefaciens)介导的大岩桐(Sinningia speciosa)遗传转化方法,司时将CFL(Cucumber-FLO-LFY)基因转入大岩桐中,期望获得提早开花的转基因植株.采用双酶切法将CFL基因连接到质粒载体pCAMBIA13011上,得到具有CaMV35S组成型启动子的植物表达载体pCA-CFL.以大岩桐无菌苗叶片为材料,进行潮霉素(hygromycin,Hyg)浓度梯度培养,确认20mg/L hyg为筛选压.采用超声波处理、农杆菌液浸泡等多种方法进行大岩桐转基因,GUS检测结果表明,超声波处理10 s的方法转化效率最高.转化后的叶片进行诱导培养并经过2轮Hyg筛选后,获得一批Hyg抗性再生植株.进一步用PCR、斑点杂交检测发现,CFL基因已整合到大岩桐基因组中.将转基因大岩桐移栽到盆中并在长日照的环境下生长直至开花.经分析表明,超过71%的转基因大岩桐比野生型提早26～32 d开花,且大部分的转基因植株不形成侧枝而是直接在顶端成花.研究结果提示,CFL基因和LEAFY(LFY)基因在功能上是同源的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴志毅		15	53	5.0	6.0
2	叶丹	浙江大学生命科学学院	28	310	10.0	17.0
3	王利琳		61	731	15.0	23.0
4	边红武	浙江大学生命科学学院	24	281	9.0	16.0
5	张晓峰		20	293	7.0	17.0
6	韩凝	浙江大学生命科学学院	30	323	9.0	17.0
7	张明哲		14	40	4.0	6.0
9	陈曦		8	35	4.0	5.0