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摘要:
将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX 19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中.提取阳性克隆子质粒进行酶切验证,表明表达载体pCX 19-Tat-GFP成功地构建并转化.用木糖诱导重组菌株后,分别使用荧光显微镜和SDS-PAGE检测外源GFP蛋白的表达分泌情况.结果显示,菌体能够发出绿色的荧光,且蛋白电泳能够在细胞质与细胞壁组分中检测到GFP蛋白条带,表明肉葡萄球菌宿主可以将表达载体pCX1 9-Tat-GFP表达的GFP在细胞质中正确折叠,并以活性形式转运到细胞壁部分.
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文献信息
篇名 肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达
来源期刊 生物技术通报 学科 生物学
关键词 肉葡萄球菌 双精氨酸转运(Tat) 信号肽 融合基因 绿色荧光蛋白(GFP) 质粒
年,卷(期) 2011,(8) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 203-207
页数 分类号 Q78
字数 3888字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 朱燕 天津科技大学后勤服务集团 2 2 1.0 1.0
2 郑秀 天津科技大学后勤服务集团 3 4 1.0 1.0
3 高强 天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部暨天津市重点实验室 7 11 1.0 3.0
4 于长燕 天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部暨天津市重点实验室 1 1 1.0 1.0
5 孟庆艳 天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部暨天津市重点实验室 1 1 1.0 1.0
6 王梦晓 天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部暨天津市重点实验室 1 1 1.0 1.0
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节点文献
肉葡萄球菌
双精氨酸转运(Tat)
信号肽
融合基因
绿色荧光蛋白(GFP)
质粒
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生物技术通报
月刊
1002-5464
11-2396/Q
大16开
北京海淀区中关村南大街12号
18-92
1985
chi
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