动物活体成像生物发光稳定细胞株的构建

• 作者: 叶棋浓 张浩 徐小洁 曹佳 程龙 范忠义 蒋凯 韩永健
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 萤光素酶 稳定细胞株 活体成像 生物发光 乳腺癌
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 216-219
• 分类号: Q78|Q-334
• 字数: 3025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.02.016

摘要

目的:构建组成型表达萤光素酶基因的载体,建立稳定高表达萤光素酶的MCF-7乳腺癌细胞株,检测其对细胞增殖的影响及在传代后的表达效果.方法:以载体pGIA.20为模板,PCR扩增萤火虫萤光素酶基因,将其克隆到载体pIRESpuro2上,将获得的pIRESpuro2-Luc经酶切和测序验证后,转染293T、MCF-7及ZR75-1细胞,通过检测萤光素酶报告基因的活性,检测其表达效果;将萤光素酶基因表达载体转染MCF-7细胞,通过嘌呤霉素筛选稳定转染细胞株,用有限稀释法挑选高表达萤光素酶基因的单克隆细胞株,并检测其对细胞增殖的影响与传代后的表达效果.结果:测序结果表明构建了萤光素酶基因表达载体,活性测定证明了其表达效果;筛选到高表达萤光素酶基因的MCF-7稳定转染细胞株,分析表明其遗传稳定性良好,对细胞的增殖没有影响.结论:构建了高表达萤光素酶基因的MCF-7稳定转染细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张浩	军事医学科学院生物工程研究所	59	336	8.0	16.0
2	徐小洁	军事医学科学院生物工程研究所	51	112	6.0	7.0
3	程龙	军事医学科学院生物工程研究所	26	79	4.0	8.0
4	蒋凯	军事医学科学院生物工程研究所	5	18	3.0	4.0
5	韩永健	军事医学科学院生物工程研究所	3	9	2.0	3.0
6	范忠义	军事医学科学院生物工程研究所	5	8	2.0	2.0
7	曹佳	军事医学科学院生物工程研究所	2	8	2.0	2.0