降低诱导温度提高毕赤酵母甲醇代谢关键酶基因转录水平和猪-α干扰素生产性能

• 作者: 史仲平 戴科科 李震 段作营 汪汇慧 金虎
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤酵母 猪-α干扰素 甲醇代谢 诱导温度 转录
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 52-57
• 分类号: Q939.97
• 字数: 4209字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2011.06.011

摘要

以一株表达猪-α干扰素(pIFN-α)重组毕赤酵母为研究对象,考察了诱导温度对pIFN-α表达、细胞代谢活性及甲醇代谢关键酶的影响.在5 L发酵罐开展毕赤酵母高密度流加培养生产表达pIFN-α研究,利用实时PCR技术对不同诱导温度、诱导稳定期的胞内甲醇代谢关键酶(包括解毒酶)基因转录水平进行定量分析.低温(20℃)可以同时提高细胞的代谢活性和猪-α干扰素的表达水平,低温(20℃)下最高pIFN-α抗病毒活性达到5.57×106 IU/mL,是30℃常温诱导下最高抗病毒活性(2.9×105 IU/mL)的19.2倍;相比于30℃ 常温诱导,20℃下醇氧化酶(AOX)、甲醛脱氢酶(FLD)、甲酸脱氢酶(FDH)、过氧化氢酶(CAT)及二羟基丙酮合成酶(DHAS)基因的转录水平明显提高,其中CAT和DHAS转录水平的增加尤为显著.低温诱导提高pIFN-α表达原因在于:(1)甲醇利用速度快,细胞代谢活性强;(2)低温诱导下甲醛产能途径和解毒能力得到加强,为合成细胞物质提供更多的能量;(3)甲醛同化途径关键酶(DHAS)转录水平在低温下增强更为显著,促使更多的碳流向细胞合成和外源蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段作营	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	84	674	14.0	21.0
2	史仲平	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	52	251	8.0	12.0
3	金虎	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	5	23	3.0	4.0
4	戴科科	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	3	10	2.0	3.0
5	汪汇慧	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	1	3	1.0	1.0
6	李震	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	3	1.0	1.0