水牛睾丸特异LDHC基因的原核表达及生物学活性研究

• 作者: 刘忠权 吴生才 洪键 王加连 石云
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: LDHC 原核表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-21
• 分类号: Q786
• 字数: 2829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.02.038

摘要

目的:克隆水牛睾丸特异Ldhc基因全长在大肠杆菌中原核表达,研究其生物学活性.方法:以水牛睾丸组织为材料提取总RNA,RT-PCR扩增Ldhc cDNA,PCR获得水牛全长Ldhc基因;连接pET-32b构建表达质粒pET-32b-Ldhc;转化BL21(DE3)大肠杆菌,IPTG诱导表达并利用SDS-PAGE分析.体外Ni离子柱纯化目的蛋白,Western印迹鉴定其抗体结合活性,同工酶谱鉴定其生物学活性.结果:成功制备了表达质粒pET-32b-Ldhc;IPTG诱导得到56KDa目的蛋白;Ni柱纯化获得纯度90%以上的蛋白;Western印迹显示目的蛋白具有特异的抗体结合活性;同工酶活性染色证明其具有乳酸脱氢酶活性.结论:试验成功制备了水牛睾丸LDH-CA蛋白,并初步验证了其生物学活性,为我们进一步探讨LDH-G4的功能及免疫节育疫苗的制备等奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石云		11	22	3.0	4.0
2	洪键	盐城师范学院江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室	15	25	2.0	3.0
3	刘忠权	盐城师范学院江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室	23	135	5.0	11.0
4	吴生才	盐城师范学院江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室	9	159	5.0	9.0
5	王加连	盐城师范学院江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室	22	152	7.0	12.0