产酶溶杆菌OH11菌株胞外酶调控相关基因ctp的克隆及功能的初步分析

• 作者: 刘凤权 刘轶儒 胡白石 范加勤 蒋淑贞 钱国良
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 产酶溶杆菌 胞外酶调控 基因克隆 敲除 功能分析
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 68-75
• 分类号: Q78|S476.8
• 字数: 5466字
• 语种: 中文

摘要

利用mariner转座子对产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes OH11进行转座诱变,构建菌株OH11的突变体文库.筛选到1株4种胞外酶(蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶)产生均减少的突变株D-11.通过亚克隆,鉴定转座子的插入位点,涉及1个羧基末端蛋白酶(carboxy-terminal protease)编码基因ctp.通过同源重组的方法对该基因进行敲除,对缺失突变体Δctp表型分析发现:(1)Δctp与野生型OH11在营养丰富型(2YT)与营养缺陷型(MMX)培养基中生长速率基本一致;(2)Δctp降低了蛋白酶、纤维素酶和β-1,3-葡聚糖酶的产生,但不影响几丁质酶的产生;(3)Δctp生物膜的产生量明显减少.研究还表明,突变体基本不改变其对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum、水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani和辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici的拮抗能力.互补菌株均恢复了野生型的相关功能.