多重实时荧光PCR快速检测沙门菌和单增李斯特菌

• 作者: 吴晓芳 徐德顺 查赘峰 沈月华 纪蕾 陈莉萍 韩建康
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 沙门菌 单增李斯特菌 双重荧光PCR 检测
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 食品安全
• 页码范围: 234-237
• 分类号: R517.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/.j.issn.1003-9961.2011.03.022

摘要

目的 建立可同时检测沙门菌、单增李斯特菌的双重实时荧光PCR快速检测方法,并应用于食品样品的检测.方法 根据GenBank上下载的沙门菌invA基因、单增李斯特菌hlyA基因的保守区序列分别设计特异性引物和TaqMan探针,建立并优化双重实时荧光PCR反应体系.对该方法的特异性、敏感性和稳定性进行评估,并应用于食品标本的检测.结果 实验结果表明,该检测方法特异性强,对大肠埃希菌、志贺菌、副溶血性弧菌等其他病原菌进行检测均未产生交叉反应.对沙门菌和单增李斯特菌纯培养物的最低检出限分别可达10 cfu/ml和100cfu/ml;并且重复性好,变异系数均小于5%;对80份食品标本同时采用本文建立的双重荧光PCR方法和单重荧光PCR方法以及传统的分离培养方法进行检测,结果显示本文建立的双重荧光PCR方法对两种病原菌的检测效果明显优于单重荧光PCR方法以及传统的分离培养法,整个检测过程可在10 h内完成,包括前增菌所用的6 h.结论 本研究建立的多重实时荧光PCR方法能同时对沙门菌和单增李斯特菌进行快速检测,并且灵敏度高、特异性好,可为食源性疾病的病原学快速检测提供新的手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈月华		26	58	4.0	6.0
2	徐德顺		59	129	6.0	9.0
3	韩建康		24	90	5.0	8.0
4	纪蕾		36	84	5.0	7.0
5	吴晓芳		48	85	5.0	7.0
6	陈莉萍		30	70	4.0	7.0
7	查赘峰		2	8	1.0	2.0