对蛴螬有活性的苏云金芽胞杆菌菌株的筛选与基因鉴定

• 作者: 刘春琴 宋福平 张杰 李克斌 束长龙 林毅 茅洁瑜
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蛴螬 苏云金芽胞杆菌 PCR-RFLP cry8基因
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 176-181
• 分类号: S476.11|S433.83
• 字数: 3492字
• 语种: 中文

摘要

为了寻找对地下害虫蛴螬有杀虫活性的基因资源,以实验室分离的500株苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株为材料,通过杀虫活性测定筛选到43株对蛴螬有活性的菌株,其中菌株C9对3种供试昆虫均有活性.光学及扫描电镜检测发现这些菌株均释放球形晶体.SDS-PAGE分析显示这些菌株均表达约130kD的蛋白.采用3种方法分析43株菌株的杀虫晶体蛋白基因类型,结果显示:其中21株只含cry8Ca;13株同时含cry8Ca和cry8Ea基因;QC4等8株菌株只能用引物HRM8F/HRM8R获得高度保守区域约110bp的扩增产物,说明这些基因的5'端序列与已知基因差异较大.测序结果经BLAST分析显示,产物序列同cry8基因的相似性均在98%以上,但其全长基因类型还需要其它方法确定.菌株QCM的PCR-RFLF图谱不同于已发现的cry8基因,推测其中含有新基因.