腺病毒介导的shRNA沉默hTERT基因表达对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 宋玉姣 肖伯奎 陈始明 陈晨 陶泽璋 韩继波
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 腺病毒载体 hTERT基因 NPC细胞
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1351-1355
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2011.12.003

摘要

目的 探讨靶向人端粒酶反转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA)对人鼻咽癌细胞株CNE-2 hTERT表达的影响,及其对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的效应.方法 构建表达绿色荧光蛋白(EGFP)基因和靶向hTERT基因短发夹RNA的重组腺病毒质粒,观察其对鼻咽癌细胞株(CNE-2)的转染效果,RT-PCR检测hTERT mRNA表达水平,Western blot检测hTERT蛋白表达水平,CK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡状况.结果 Adv-EGFP-shTERT重组腺病毒质粒转染率可达90％以上,成功转染CNE-2细胞24 h后,hTERT mRNA的表达水平显著下降,转染48 h后,hTERT蛋白表达明显下调,细胞增殖活性受到显著抑制,细胞凋亡率可达23.0％.结论 腺病毒载体介导靶向hTERT基因的RNA干扰,能显著抑制端粒酶反转录酶表达,进而抑制端粒酶活性,抑制CNE-2细胞增殖并诱导其凋亡,为鼻咽癌的基因治疗研究提供了理论基础.