肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型多重反转录-聚合酶链反应的建立及初步应用

• 作者: 朱汝南 王婷婷 王芳 赵林清 邓洁 邓莉 钱渊
• 来源期刊: 微生物与感染
• 学科: 医学
• 关键词: 手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A16型 多重反转录-聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 11-17
• 分类号: R5
• 字数: 5454字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2011.01.004

摘要

本文旨在建立一种快速、高效的检测肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)的方法,用于儿童手足口病的病原学监测.通过设计肠道病毒通用引物和CA16、EV71的型特异性引物,建立以不同引物浓度配比及两阶段退火温度提高检测敏感度和特异度的多重反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,并对首都儿科研究所附属儿童医院2010年3～10月收集的371例手足口病患儿381份临床标本同时进行病毒分离和核酸检测.结果显示,本研究建立的多重RT-PCR方法对CA16和EV71的最低模板检测浓度分别为5.32 pg/ml和0.64 pg/ml,反应特异度为100%.应用该方法检测381份手足口病临床标本的总阳性率为77.4%,其中CA16与EV71的检测阳性率分别为31.8%和35.4%,两者检测阳性比为1∶1.1.以病毒分离为标准,多重RT-PCR对CA16及EV71检测的准确率分别为95.2%和98.6%.因此,本研究新建立的多重RT-PCR方法准确、简便,适用于较大量样本的手足口病病原学监测.2010年引起北京地区儿童手足口病的主要病原为CA16和EV71.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱汝南		49	694	14.0	25.0
3	邓洁	首都儿科研究所病毒研究室	54	828	15.0	28.0
4	赵林清	首都儿科研究所病毒研究室	37	362	10.0	18.0
5	钱渊		93	1074	15.0	29.0
7	王芳	首都儿科研究所病毒研究室	46	569	12.0	23.0
8	邓莉		36	499	12.0	22.0
13	王婷婷		25	160	6.0	12.0