家蚕Poly(A)结合蛋白基因BmPABP的克隆及序列与功能分析

• 作者: 夏庆友 徐汉福 段晓利 王峰 王根洪 马三垣
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 Poly(A)结合蛋白 基因克隆 序列结构 细胞转染 功能
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 412-418
• 分类号: S881.2|Q78
• 字数: 4475字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2011.03.006

摘要

Poly(A)结合蛋白[Poly(A)-binding protein,PABP]是广泛存在于真核生物细胞内的一类高保守性蛋白,通过与Poly (A)的结合形成翻译起始复合物调节mRNA的稳定性和翻译效率.利用RT-PCR方法克隆了家蚕Poly(A)结合蛋白基因BmPABP,该基因含有4个外显子,开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为1 812bp,编码603个氨基酸,具有4个典型的RNA识别模体(RNA recognizafion motif,RRM)和1个保守的C末端结构域.基因芯片数据分析显示,BmPABP在家蚕5龄第3天幼虫各组织以及5龄第4天至化蛾阶段具有高水平的转录表达.构建基于家蚕Actin4启动子的瞬时转染载体pSLA4-BmPABP,将其与携带有荧光素酶报告基因的pSLA4-LUC质粒分别按1∶1和2∶1的摩尔比混合后共转染昆虫Sf9细胞,于转染后72 h检测荧光素酶活性,结果显示荧光素酶的活性较对照分别提高了11.9倍和7.5倍.研究结果初步证实了BmPABP具有促进目的基因表达的功能,同时提示利用BmPABP有望提高外源基因在转基因家蚕中的表达水平,可应用于家蚕生物反应器研究.