犬瘟热病毒H基因5’端的表达纯化及抗原性分析

• 作者: 易立 杨莘 王建科 程世鹏 许红丽 金卉
• 来源期刊: 特产研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬瘟热病毒 H基因5'端 表达纯化 抗原性分析
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-9
• 分类号: Q786
• 字数: 2925字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4721.2011.03.002

摘要

为了获得高纯度的犬瘟热病毒5’端H蛋白,本研究通过参考GenBank中发表的CDV H蛋白基因序列,用Oligo6.0软件设计一对特异性引物,从犬瘟热病毒疫苗毒株CDV3和野毒株CDVSD株提取总RNA,经RT-PCR扩增得到388bp的基因片段,将目的基因与原核表达载体pET28a(+)连接构建了pET28a-CDV3-H5和pET28a-CDVSD-H5重组质粒,转化到大肠杆菌Bl21(DE3)中进行鉴定、测序、IPTG诱导表达.重组表达载体pET28a-CDVSD-H5在大肠杆菌中成功的表达,目的重组蛋白为22kD,而pET28a-CDV3-H5未能表达.经Ni-NTA洗脱纯化后,rCDVSD-H5蛋白被成功纯化.Western blot分析表明,表达产物能够被犬抗CDV阳性血清所识别,具有良好的抗原性.为血清学诊断方法的建立和基因工程疫苗的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金卉	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0